H2O2预处理通过ERK1／2和p38 MAPK信号通路上调14-3-3蛋白在PC12细胞中的表达

• Published in: Neuroscience bulletin 2008, Vol.24 (4), p.244-250
• Main Author: 苏庆杰 陈小武 陈志斌 孙圣刚
• Format: Article
• Language: English
• Subjects: 14-3-3蛋白; ERK1／2; H2O2预处理; p38有丝分裂原激活蛋白激酶; PC12细胞
• ISSN: 1673-7067; 1995-8218

目的探讨H2O2预处理对1-甲基-4-苯基吡啶离子（1-methyl-4-phenylpyridinium，MPP^＋）诱导PC12细胞毒性损伤的保护作用及其可能的机制。方法分别用3-（4，5-二甲基噻唑-2）-2，5-二苯基四氮唑嗅盐[3-（4，5-dimethylthiazol-2-yl）-2，5-diphenyltetrazolium bromide，MTT]和4，6-二氨基-2-苯基吲哚（4′，6′．diamidino-2-phenylindole，DAPI）染色技术检测PC12细胞的活力及细胞凋亡核形态改变；Westem blot检测PC12细胞中14-3-3蛋白、磷酸化p38 MAPK的水平。酶联免疫吸附实验（Enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA）试剂盒检测ERK1／2磷酸化水平。结果MPP^＋处理PC12细胞24h使细胞活力显著下降（51．6％），DAPI染色显示（51．3±6．6）％的PC12细胞呈现核固缩等细胞凋亡形态改变；H2O2预处理能显著增加PC12细胞活力（83．4％），减少凋亡细胞数[（24．9±4．3）％]，说明H2O2预处理能对抗MPP^＋毒性，对PC12细胞具有保护作用。Western blot结果显示，H2O2预处理在减少PC12细胞凋亡的同时伴随有14-3-3蛋白及磷酸化p38 MAPK表达上调；ELISA实验显示ERK1／2磷酸化水平显著增加。相关分析显示14-3-3蛋白表达的上调与ERK1／2磷酸化水平呈正相关（r=0．923，P〈0．01），而且PD98059抑制ERK1／2磷酸化后，H2O2预处理诱导14-3-3蛋白表达上调的作用消失。结论H2O2预处理能对抗MPP^＋对PC12细胞的毒性作用，这种保护作用与细胞内14-3-3蛋白表达上调有关；而14-3-3蛋白表达上调与ERK1／2和p38MAPK信号通路的激活有关。