The determination of phenobarbital and diphenyl-hydantoin in blood by differential pulse polarography

• Published in: Analytica chimica acta 1973, Vol.64 (2), p.165-175
• Main Authors: Brooks, M.A., De Silva, J.A.F., Hackman, M.R.
• Format: Article
• Language: English
• ISSN: 0003-2670; 1873-4324
• DOI: 10.1016/S0003-2670(01)82434-X

A sensitive differential pulse polarographic assay was developed for the determination of phenobarbital or diphenylhydantoin in blood. The assay involves the selective extraction of the compound into chloroform from whole blood buffered to pH 7.0. After suitable “clean-up” of the sample, each compound is nitrated in 10% potassium nitrate in sulfuric acid at 25° for 1 h. The nitro-derivatives are extracted into ethyl acetate, and the residues are dissolved in 1 M phosphate buffer (pH 7.0) or 0.1 M sodium hydroxide for phenobarbital and diphenylhydantoin, respectively; the solutions are deoxygenated, and analyzed by differential pulse polarography. The overall recovery of phenobarbital and diphenylhydantoin from blood was 72.3% ±6.5 (s r) and 76.7 ±2.3 (s r) respectively. The sensitivity limit is 1–2 μg ml -1 of blood for both compounds. A modified assay for the determination of both compounds in blood with t.l.c. separation was also developed. On propose une méthode polarographique différentielle sensible pour le dosage de phénobarbital ou de diphénylhydantoïne dans le sang. Elle consiste en une extraction sélective dans le chloroforme, à partir du sang total, tamponné à pH 7.0. On procède ensuite à une nitration par le nitrate de potassium en milieu acide sulfurique. Les nitrodérivés sont extraits dans l'acétate d'éthyle. Les résidus sont finalement dissous dans un tampon phosphate (pH 7.0) et analysés par polarographie. La limite de sensibilité est de 1 à 2 μg ml -1 de sang pour les deux composés. Für die Bestimmung von Phenobarbital und Diphenylhydantoin in Blut wurde eine empfindliche Methode der Differential-Pulse- Polarographie entwickelt. Bei dem Verfahren wird die Verbindung aus dem auf pH 7.0 gepufferten Blut mit Chloroform selektiv extrahiert. Nach einer geeigneten Vorbehandlung der Probe wird jede Verbindung mit 10% Kaliumnitrat in Schwefelsäure l h lang bei 25° nitrièrt. Die Nitro-Derivate werden mit Äthylacetat extrahiert. Der Rückstand wird im Falle von Phenobarbital in 1 M Phosphatpuffer (pH 7.0) und im Falle von Diphenylhydantoin in 0.1 M Natriumhydroxid gelöst; die Lösungen werden nach Entfernung des Sauerstoffs durch Differential-Pulse-Polarographie analysiert. Der insgesamt aus Blut erfasste Anteil von Phenobarbital und Diphenylhydantoin betrug 72.3% ±6.5 (s r) bzw. 76.7%±2.3. Die Empfindlichkeitsgrenze für beide Verbindungen in Blut ist 1–2 mg ml -1. Ein abgewandeltes Verfahren für die Bestimmung beider Verbindungen in Blut unter Anwendu