Utilisation du modèle Drosophile dans la validation de gènes candidats dans le syndrome néphrotique cortico-résistant

• Published in: Archives de pédiatrie : organe officiel de la Société française de pédiatrie 2016-06, Vol.23 (6), p.639-640
• Main Authors: Lachaussée, N., Gonçalves, S., Arrondel, C., Helmstaedter, M., Kretz, O., Boyer, O., Gribouval, O., Bole-Feysot, C., Nitschke, P., Gubler, M.-C., Huber, T.B., Mollet, G., Simons, M., Antignac, C.
• Format: Article
• Language: fre
• ISSN: 0929-693X; 1769-664X
• DOI: 10.1016/j.arcped.2016.03.039

Le syndrome néphrotique corticorésistant (SNCR) est une maladie génétiquement hétérogène. En utilisant le séquençage d’exomes, nous avons pu identifier deux variants faux-sens homozygotes, potentiellement délétères dans les gènes ADD3 et KAT2B chez les membres d’une famille consanguine atteints d’un syndrome néphrotique syndromique. Le premier gène code pour l’adducine, un important régulateur du cytosquelette d’actine et le second pour la lysine acetyltransferase KAT2B responsable de l’acétylation des histones. Pour évaluer l’importance d’ADD3 et KAT2B sur la fonction podocytaire et l’impact de leurs mutations, nous avons utilisé le modèle Drosophile. Des expériences de knock-down (KD) et de sauvetage avec le gène humain sauvage et muté ont été réalisées, en utilisant le système UAS-GAL4 dans les néphrocytes de Drosophile, l’équivalent chez la mouche des podocytes. Des défauts au niveau moléculaire et ultrastructurel ont été mis en évidence en utilisant des immunomarquages, la microscopie électronique et des études fonctionnelles pour évaluer les fonctions de filtration/endocytose des néphrocytes. Dans les néphrocytes de larves de stade 3, le KD d’adducine mais pas celui de KAT2B interrompait le cytosquelette d’actine, délocalisait la protéine du diaphragme de fente Kirre et entraînait une diminution de la filtration/endocytose. Au niveau ultrastructurel, le KD d’ADD3 entraînait une diminution du nombre de diaphragmes de fente et un effacement des pédicelles. Au stade adulte, les KD d’adducine et KAT2B entraînaient une diminution du nombre de néphrocytes. Alors que les expériences de sauvetage pour KAT2B sont toujours en attente, la forme sauvage mais pas la forme mutée d’adducine permet de sauver le phénotype du KD d’ADD3 concernant les défauts du cytosquelette d’actine et la mauvaise localisation de Kirre. Ces résultats suggèrent qu’ADD3 joue un rôle majeur dans la morphologie et la fonction du podocyte et que la mutation d’ADD3 pourrait être responsable de certaines formes de SNCR. Cependant l’impact de la mutation de KAT2B sur le phénotype des patients ne peut pas être exclu.