Design and introduction of a rational mechanical eluting system for leukocyte recovery from leukoreduction filters: A cell differential approach

• Published in: Transfusion clinique et biologique : journal de la Société française de transfusion sanguine 2020-08, Vol.27 (3), p.172-178
• Main Authors: Sasani, N., Roghanian, R., Emtiazi, G., Jalali, S.M., Nikougoftar Zarif, M., Aghaie, A.
• Format: Article
• Language: English
• Subjects: Cell recovery; Cytométrie en flux; Filtre de leucoréduction; Flow cytometry; Leukoreduction filter; Récupération cellulaire; Viability; Viabilité
• ISSN: 1246-7820
• DOI: 10.1016/j.tracli.2020.03.007

The use of leukoreduction filters has been highly increased in Iranian Blood Transfusion Centers within the last decade to provide sufficient leukoreduced blood products from healthy repeated donors for alloimmunized or sensitive recipients. Leucoflex LCR5, the dominant brand which procured by the Iranian Blood Transfusion Organization, is the most updated generation of the filters used around the world. In this study, we recovered trapped leukocytes from these filters using different buffer solutions and optimized elution method. The count of recovered cells assessed by cell counter, and cell viability was detected using trypan blue staining. The percent of leukocyte subpopulations was evaluated using a panel of monoclonal antibodies and flow cytometric analysis. It illustrated that a buffer solution consistent with PBS in pH 7.2 containing 2mM EDTA and 4% (w/w) Dextran 40 was the best buffer for LCR5 filter backflushing. The white cell counted as 4.56×108 Granulocytes, 3.34×108 Lymphocytes, and 0.64×108 Monocytes according to analysis with auto hemoanalysis and flow cytometric methods. The study guides and assists blood management systems in arranging a national blood profile database for future cell therapy strategies. Also, the recovered cells could be of significance in stem cell research, cellular interaction studies as well as novel molecular developments in drug discovery. L’utilisation de filtres de leucoréduction a été fortement augmentée dans les centres iraniens de transfusion sanguine au cours de la dernière décennie afin de fournir suffisamment de produits sanguins réduits par leucoréduction de donneurs répétés en bonne santé pour les receveurs allo-immunisés ou sensibles. Leucoflex LCR5, la marque dominante qui s’est procurée par l’Organisation iranienne de transfusion sanguine, est la génération la plus récente des filtres utilisés dans le monde. Dans cette étude, nous avons récupéré les leucocytes piégés de ces filtres en utilisant différentes solutions tampons et une méthode d’élution optimisée. Le nombre de cellules récupérées a été évalué par le compteur de cellules et la viabilité cellulaire a été détectée en utilisant une coloration au bleu trypan. Le pourcentage de sous-populations de leucocytes a été évalué en utilisant un panel d’anticorps monoclonaux et une analyse cytométrique en flux. Il a illustré qu’une solution tampon compatible avec du PBS à pH 7,2 contenant 2mM d’EDTA et 4 % (p/p) de dextran 40 était le meilleur tampon pour