Evaluación de la producción experimental de enzimas coagulantes de leche utilizando cepas de Rhizomucor spp

• Published in: Revista Colombiana de biotecnologia 2015-01, Vol.17 (1), p.54-60
• Main Authors: Morillo Piña, Osmar T, García Lugo, Pablo J, Guerrero Cardena, Balmore Ruizdael, Torres Vielma, Yzoleth, Castañeda Ruiz, Rafael F
• Format: Article
• Language: Spanish
• Subjects: actividad proteolítica; Biotechnology; BIOTECHNOLOGY & APPLIED MICROBIOLOGY; Coagulation; Enzymes; fuerza de cuajo; microbial rennet; Microbiology; productividad; productivity; proteolitic activity; renina microbiana; rennet strength
• ISSN: 0123-3475; 1909-8758; 1909-8758
• DOI: 10.15446/rev.colomb.biote.v17n1.50701

La producción experimental de enzimas coagulante de leche se llevó a cabo en un medio de cultivo de laboratorio durante 190 h de incubación, utilizando tres cepas certificadas de Rhizomucor pusillus, R. miehei y dos especies nativas de Rhizomucor spp. BIOMI-12 y 13. La evaluación se realizó midiendo la concentración de glucosa y proteína durante la incubación, estimación de la productividad, actividad específica, índice fuerza de cuajo/actividad proteolítica en los extractos enzimáticos crudos, determinación de los pesos moleculares y actividad proteolítica en los extractos enzimáticos parcialmente purificado. Todas las cepas mostraron un consumo de glucosa similar, el mismo comportamiento se observó en el contenido de proteína, excepto la cepa BIOMI-13. Los incrementos en el contenido de proteínas después del descenso, coincidieron con la máxima actividad coagulante registrada por cada cepa, siendo el extracto crudo de la cepa BIOMI-13 la de mayor actividad coagulante (148,15 FC), productividad (3,09 FC/h), índice fuerza de cuajo/actividad proteolítica (142,60 FC/U) y actividad específica (1.062,00 FC/mg). Los extractos enzimáticos parcialmente purificados de las cepas R miehei 37, Rhizomucor spp BIOMI-12 y 13, presentaron proteínas con pesos moleculares en aproximadamente 22,6 y 46,52 KDa, mientras el extracto R pusillus 39 presentó una banda adicional de 39,6 KDa. En el zimograma se observó para todas las cepas actividad proteolítica en las bandas comprendidas entre 40-50 KDa y 20-22 KDa, no así para el R pusillus 36, donde fue escasa. Finalmente se determinó que la cepa BIOMI-13, tiene la mayor capacidad para producir enzimas coagulantes de la leche.