Produção e purificação de imunoglobulinas Y policlonais anti-Leptospira spp

• Published in: Pesquisa Veterinária Brasileira 2013-09, Vol.33 (9), p.1097-1102
• Main Authors: Tavares, Tatiane C.F., Soares, Pollyanna M., Neves, João H.F.F., Soares, Mayara M., F. Junior, Álvaro, Souza, Dayane L.N. de, Ávila, Veridiana M.R., Lima-Ribeiro, Anna M.C.
• Format: Article
• Language: eng ; por
• Subjects: Galinhas; gema de ovos; imunoglobulinas Y; Leptospira interrogans; leptospirose; VETERINARY SCIENCES
• ISSN: 1678-5150
• DOI: 10.1590/S0100-736X2013000900008

Objetivou-se verificar se galinhas imunizadas com uma solução de Leptospira interrogans inativadas e proteínas de membrana externa do sorovar Hardjo, poderiam produzir anticorpos policlonais específicos anti-leptospiras, detectáveis em testes ELISA. Foram imunizados oito galinhas com 25 semanas de idade, da raça White Leghorn, sendo três imunizadas com uma suspensão de leptospiras inativadas, três com uma solução de proteínas de membrana externa extraída do sorovar Hardjo e duas controle. Coletas de sangue foram realizadas quinzenalmente e de ovos diariamente. A IgY foi purificada a partir da gema dos ovos utilizando para a delipidação o método de diluição em água ácida e a precipitação com sulfato de amônio. Nos testes ELISA realizados para verificar a especificidade da IgY, foi demonstrada a produção de anticorpos anti-Leptospira, tanto no soro quanto nas gemas purificadas. O pico de produção de anticorpos específicos ocorreu na 5º semana após a primeira imunização. Ficou demonstrada a possibilidade da indução da produção de anticorpos específicos em galinhas imunizadas com leptospiras do sorovar Hardjo inativadas, bem como, com proteínas de membrana externa (PME) extraidas desse sorovar. As galinhas imunizadas com uma suspensão de leptospiras inativadas ou com PME de Leptospira interrogans do sorovar Hardjo produziram anticorpos reativos a PME Hardjo detectáves por teste ELISA.