Immunolocalization of Sonic Hedgehog in Embryo-Fetal Mouse

• Published in: International journal of morphology 2018-06, Vol.36 (2), p.693
• Main Authors: Conei, Daniel, Saint-Pierre, Gustavo, Fierro, Roberto, del Sol, Mariano, Rauco, Mariana Rojas
• Format: Article
• Language: Spanish
• ISSN: 0717-9367

Sonic hedgehog (Shh) es un morfogeno esencial para el desarrollo de diversas estructuras, tales como notocorda, placa del piso del tubo neural, miembros, entre otros. Se busco determinar la inmunolocalizacion de Shh en embriones y fetos de raton. Para ello, se eutanasiaron 10 ratones gestantes (Mus musculus) BALB/c, un grupo de 5 animales a los 12,5 dias post- coito (dpc), y otro grupo a los 17,5 dpc. Los embriones y fetos obtenidos fueron fijados en formalina al 10 % tamponada en PBS e incluidos en paraplast. Se realizaron cortes transversales seriados. Se utilizo anticuerpo policlonal Shh (Santa Cruz Biotechnology, H-160, conejo), dilucion 1:100. Se identifico y describio la inmunolocalizacion de las muestras marcadas positivamente. La expresion de Shh en los embriones de 12,5 dpc fue inmunopositiva en notocorda, placa del piso del tubo neural, precartilago de radio y ulna, y practicamente todos los epitelios: bronquial, intestinal, vejiga y uretra. En la etapa fetal, a los 17,5 dpc la inmunopositividad desaparece en el cartilago a excepcion de zonas de osificacion, disminuye en la epidermis pero aparece en foliculos pilosos. La mucosa intestinal se ha diferenciado en segmentos, mostrando una inmunotincion mayor a nivel de las vellosidades intestinales. Shh actua en distintos estadios del periodo gestacional, siendo clave en la diferenciacion de distintas estructuras. En etapas embrionaria, es vital en la formacion del sistema nervioso, organogenesis y formacion de miembros, por lo que su expresion se encuentra en estas zonas. Sin embargo, en la etapa fetal la expresion cambia a estructuras de mayor especializacion como foliculo piloso y vellosidades intestinales. PALABRAS CLAVE: Sonic hedgehog; Morfogeno; Organogenesis; Inmunohistoquimica. Sonic hedgehog (Shh) is an essential morphogen for the development of various structures, such as notochord, neural tube floor plate, limbs, among others. We sought to determine the immunolocalization of Shh in embryos and mouse fetuses. To do this, 10 pregnant mice (Mus musculus) BALB /c were euthanized, a group of 5 animals at 12.5 days postcoitus (dpc), and another group at 17.5 dpc. Embryos and fetuses obtained were fixed in 10 % formalin buffered in PBS and embedded in paraplast. Serial cross sections were made. Polyclonal antibody Shh (Santa Cruz Biotechnology, H-160, rabbit), dilution 1:100 was used. The immunolocalization of the positively labeled samples was identified and described. Shh expression in 12.5 dp