Enzymic Analysis of Glutamic Acid in Corollas from Cut 'Sonia' Roses: Simplification of the Boehringer Mannheim Procedure for Destruction of Reducing Substances / Enzymatische Analyse von Glutaminsäure aus Korollen von ‚Sonia‘-Schnittrosen. Vereinfachung der Boehringer Mannheim-Methode zum Abbau reduzierender Verbindungen

• Published in: Gartenbauwissenschaft 1990-03, Vol.55 (2), p.60-62
• Main Authors: Velasco, Amalia, Gorin, Natalio
• Format: Article
• Language: English
• Subjects: Amino acids; Anthers; Chemical suspensions; Corolla; Estimation methods; Oxidation
• ISSN: 0016-478X; 2364-6047

Glutamic acid in 6 samples from freeze-dried corollas of cut 'Sonia' roses was estimated enzymically: (1) Without destroying the reducing substances in the perchlorate free extract before pouring it into the cuvette. (2) With destruction by the standard method of Boehringer Mannheim; i. e. oxidation of reducing substances with H₂O₂ in a strong alkaline medium followed by adjustment of the pH to 7-8 with sulphuric acid (1 mol/l). Adjustment of the pH of a strong alkaline solution with a strong acid solution is tedious. (3) A simplified method that involves adjusting the pH by buffering the solution with the oxidized substances. The components of the buffer (triethanolamine/phosphate) plus Triton X-100 have twice the concentration of the buffer used in the cuvette. This, when the oxidized solution is buffered and poured into the cuvette, there is no dilution of the components. The mean of Method 1 (25 ± 5.3 mmol/kg) was significantly higher (α= 0.05) than those of Method 2 (13 ± 1.4 mmol/kg) and Method 3 (17 ± 1.9 mmol/kg), because of the non specific reduction of iodonitrotetrazolium chloride to formazan. The mean of Method 3 was significantly higher than that from Method 2, Probably the system in the cuvette did not limit the high velocity of the Lglutamate reaction and the optimum concentration of Triton X-100 stabilized the formazan as well as its molecular absorption coefficient. Die enzymatische Bestimmung von Glutaminsäure wurde in 6 Mustern gefriergetrockneter Korollen von ,Sonia‘-Schnittrosen wie folgt ausgeführt: Methode 1) Ohne Abbau der reduzierenden Verbindungen im perchloratfreien Extrakt, welcher in die Küvette gebracht wird. Methode 2) Mit Abbau der reduzierenden Verbindungen nach der Boehringer (Mannheim) Standardmethode: Oxidation mit H₂O₂ in stark alkalischer Lösung und anschließender pH-Einstellung auf 7-8 mit Schwefelsäure (1 mol/l). Methode 3) ist eine vereinfachte Methode, nach welcher der pH-Wert über die Pufferune der Lösung mit den oxidierten Verbindungen eingestellt wird. Die Pufferlösung (Triaethanolamin/Phosphat) mit Triton X-100 hat die doppelte Konzentration der in der Küvette vorgelegten Pufferlösung. Auf diese Weise erfolgt keine Verdünnung beim Einbringen der oxidierten Lösung in die Küvette. Der Mittelwert aus Methode 1 (25 ± 5.3 mmol/kg) war signifikant (α= 0.05) höher als der Mittelwert von Methode 2 (13 ± 1.4 mmol/kg) und aus Methode 3 (17 ± 1.9 mmol/kg). Das Ergebnis ist der nicht spezifischen Reduktion des Jodonitrotet