Dissection of Anoplophora glabripennis (Coleoptera: Cerambycidae) larval tissues for physiological and molecular studies

• Published in: Canadian entomologist 2020-06, Vol.152 (3), p.399-409
• Main Authors: Torson, Alex S., Des Marteaux, Lauren E., Bowman, Susan, Zhang, Meng Lei, Ong, Kevin, Doucet, Daniel, Sinclair, Brent J., Roe, Amanda D.
• Format: Article
• Language: English
• Subjects: Abdomen; Anoplophora glabripennis; Aqueous solutions; Biological activity; Body organs; Carbohydrates; Cerambycidae; Coleoptera; Dissection; Entomology; Fat body; Forestry; Ganglia; Haemolymph; Hemolymph; Hindgut; Homeostasis; Insects; Laboratories; Larvae; Lipids; Malpighian tubules; Midgut; Morphology; Muscles; Organs; Physiology; Quarantine; Thorax; Tissue; Tissues
• ISSN: 0008-347X; 1918-3240
• DOI: 10.4039/tce.2020.22

Many biological processes are partitioned among organs and tissues, necessitating tissue-specific or organ-specific analysis (particularly for comparative -omics studies). Standardised techniques for tissue identification and dissection are therefore imperative for comparing among studies. Here we describe dissection protocols for isolating six key tissues/organs from larvae of the Asian longhorned beetle, Anoplophora glabripennis (Motschulsky) (Coleoptera: Cerambycidae): the supraoesophageal ganglion, posterior midgut, hindgut, Malpighian tubules, fat body, and thoracic muscle. We also describe how to extract haemolymph and preserve whole larvae for measurements such as protein, lipid, and carbohydrate content. We include dissection protocols for both fresh-killed and previously frozen specimens. Although this protocol is developed for A. glabripennis , it should allow standardised tissue collection from larvae of other cerambycids and be readily transferrable to other beetle taxa with similar larval morphology. Les processus physiologiques et moléculaires ont cours au sein de différents tissus, ce qui nécessite pour chacun des analyses distinctes, en particulier dans le cadre d’études «omiques» comparées. Il est donc impératif de standardiser les techniques de dissection et les protocoles d’identification des tissus pour comparer des études. Nous décrivons ici les protocoles de dissection pour isoler six tissus ou organes clés de larves du longicorne asiatique Anoplophora glabripennis (Motschulsky) (Coleoptera: Cerambycidae), soient le ganglion supraoesophagien, l’intestin moyen, le tube digestif postérieur, les tubules de Malpighi, le corps gras et les muscles thoraciques. Nous décrivons également comment extraire l’hémolymphe et conserver les larves entières pour effectuer des mesures de teneur en protéines, en lipides et en glucides. Nous incluons des protocoles de dissection non seulement pour les échantillons frais, mais aussi pour les échantillons congelés, afin d’aider les chercheurs qui n’ont pas accès à des spécimens vivants. Bien que ces protocoles aient été élaborés pour A. glabripennis , ils devraient permettre de standardiser la collecte de tissus chez les larves d’autres cérambycidés, et être aisément transférables à d’autres taxons de coléoptères avec une morphologie larvaire similaire.