Enzyme linked immunosorbent assay for identification of whole Mycobacterium bovis isolates with the monoclonal antibodies

• Published in: Tubercle and lung disease 1996-08, Vol.77 (4), p.348-352
• Main Authors: Androsova, M.V., Vladimirsky, M.A., Vasilenkova, O.V., Khodun, L.M.
• Format: Article
• Language: English
• Subjects: Animals; Antibodies, Monoclonal; Antibody Specificity; Cattle; Enzyme-Linked Immunosorbent Assay - methods; Epitopes - immunology; Humans; Hybridomas - immunology; Mice; Mice, Inbred BALB C; Mycobacterium - immunology; Mycobacterium bovis; Mycobacterium bovis - immunology; Mycobacterium bovis - isolation & purification
• ISSN: 0962-8479; 1532-219X
• DOI: 10.1016/S0962-8479(96)90100-8

Objective: The development of a test system for identification of Mycobacterium bovis with the use of monoclonal antibodies (Mabs). Design: BALB/c mice were immunized with whole gamma-radiation-exposed M. bovis strains. The splenocytes of the immunized mice were used for producing hybridomes which generated Mabs specific to M. bovis. The specificity of the Mabs was determined with the ELISA procedure for the whole cells of the 11 mycobacteria of various species fixed in the wells of a microtitre plate. The optimal conditions for performing identification were selected. Results: Three Mabs specific to M. bovis have been produced which identify various epitopes of the protein with a molecular weight of 31 kD. The ELISA tests with the 2A1 Mab have been conducted for 213 strains of 15 species of mycobacteria. The technique has been shown to be highly specific and reproducible. Conclusion: An ELISA test system with a Mab for identification of M. bovis has been developed. Objectif: Mise au point d'un test d'identification de Mycobacterium bovis par les anticorps monoclonaux. Schéma: Des souris BALB/c ont été immunisées par des souches entières de M. bovis préalablement exposées à des radiations gamma. Les splénocytes des souris immunisées ont été utilisés pour produire des hybridomes générant des anticorps monoclonaux spécifiques pour M. bovis. La spécificité des anticorps monoclonaux a été déterminée par la technique ELISA à l'égard de cellules mycobactériennes entières de 11 espèces fixées dans les puits des plaques à microtitrage. On a recherché les conditions optimales pour l'identification. Résultats: On a produit 3 anticorps monoclonaux spécifiques de M. bovis qui permettent d'identifier divers épitopes de la protéine dont le poids moléculaire est de 31 kD. Les tests ELISA avec l'anticorps monoclonal 2A1 ont été exécutés sur 213 souches de 15 espèces de mycobactéries. La technique s'avère hautement spécifique et reproductible. Conclusion: L'on a pu mettre au point un système ELISA faisant appel à un anticorps monoclonal pour l'identification de M. bovis. Objetivo: Desarrollar un test para la identificación de Mycobacterium bovis utilizando anticuerpos monoclonales (Mabs). Metodo: Se inmunizaron ratones BALB/c con cepas enteras de M. bovis expuestas a radiaciones gama. Los esplenocitos de los ratones inmunizados fueron usados para producir hibridomas que generaron Mabs especificos para M. bovis. La especificidad de los Mabs fue determinada con la técnica EL