白杨素通过JAK-STATs信号通路抑制内毒素诱导的巨噬细胞炎症反应

• Published in: 南方医科大学学报 2018, Vol.38 (3), p.243-250
• Main Authors: 齐世美, 李强, 姜琦, 戚之琳, 章尧
• Format: Article
• Language: Chinese
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4254.2018.03.02

目的 探讨白杨素对LPS诱导的RAW264.7细胞炎症的调控机制.方法 分别用不同浓度(0、5、10、20、40、60、80、100、150、200 μg/mL)白杨素作用RAW264.7细胞24 h后,采用CCK-8检测细胞活力值;分别用(10、30、60 μg/mL)白杨素预处理RAW264.7细胞2 h后,用LPS刺激RAW264.7细胞18 h后,采用ELISA法检测炎症因子TNF-α、IL-6和MCP-1的释放水平;分别用(10、30、60 μg/mL)白杨素预处理RAW264.7细胞2 h后,用LPS刺激RAW264.7细胞4 h后,运用Western blotting法检测JAK-1、JAK-2、STAT-1、STAT-3的磷酸化水平;分别用(10、30、60 μg/mL)白杨素预处理RAW264.7细胞2 h后,用LPS刺激RAW264.7细胞15 min后,运用CM-H2DCFDA荧光探针检测RAW264.7细胞内活性氧簇水平;运用ROS清除剂NAC处理RAW264.7细胞,检测ROS对LPS诱导RAW264.7细胞JAK-STATs信号和炎症反应的影响;运用激光共聚焦显微镜观察转录因子STAT-1和STAT-3核转位情况.结果 在白杨素浓度低于60 μg/mL时,对RAW264.7细胞活力没有显著影响,因此我们选择10、30、60 μg/mL白杨素作为抑制炎症作用的低、中、高剂量组;白杨素剂量依赖性地抑制LPS诱导的炎症蛋白iNOS的表达;白杨素剂量依赖性的下调LPS诱导的RAW264.7细胞中促炎因子TNF-α、IL-6和MCP-1的释放(P