miR-324-5p通过抑制Syk/Ras/c-fos通路降低脂多糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞增殖

目的 探讨miR-324-5p调控Syk/Ras/c-fos信号通路对大鼠肾小球系膜(HBZY-1)细胞增殖能力的影响.方法 体外培养HBZY-1细胞;设计并合成miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC片段;采用Lipo3000试剂盒瞬时转染miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC片段至脂多糖(LPS)诱导的HBZY-1细胞内,RT-qPCR验证转染效率;将HBZY-1细胞分为对照组(生理盐水),LPS组(LPS 0.5μg/mL),LPS+mimics组(LPS 0.5μg/mL+miR-324-mimics),LPS+...

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Published in:南方医科大学学报 2020, Vol.40 (11), p.1571-1578
Main Authors: 王晶, 祝晓丽, 秦秀娟, 姜辉, 高雅晨, 高家荣
Format: Article
Language:Chinese
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Description
Summary:目的 探讨miR-324-5p调控Syk/Ras/c-fos信号通路对大鼠肾小球系膜(HBZY-1)细胞增殖能力的影响.方法 体外培养HBZY-1细胞;设计并合成miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC片段;采用Lipo3000试剂盒瞬时转染miR-324-5p mimics,miR-324-5p mimics-NC片段至脂多糖(LPS)诱导的HBZY-1细胞内,RT-qPCR验证转染效率;将HBZY-1细胞分为对照组(生理盐水),LPS组(LPS 0.5μg/mL),LPS+mimics组(LPS 0.5μg/mL+miR-324-mimics),LPS+mimics-NC组(LPS 0.5μg/mL+miR-324-mimics-NC);MTT法检测各组HBZY-1细胞增殖活性;RT-qPCR法检测各组细胞miR-324-5p及Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-fos mRNA的表达;Western blot和免疫荧光法检测各组细胞p-Syk、Ras、p-MEK1/2、p-ERK1/2、c-fos蛋白的表达.结果 MTT结果显示,LPS组细胞增殖水平较正常组显著升高,与LPS组及LPS+mimics-NC组相比,LPS+mimics组细胞增殖能力降低;RT-qPCR结果显示,LPS+mimics组中miR-324-5p表达明显高于LPS组及LPS+mimics-NC组,且LPS+mimics组中Syk、Ras、MEK1/2、ERK1/2、c-fos mRNA的表达显著低于LPS组及LPS+mimics-NC组,差异具有统计学意义(P
ISSN:1673-4254
DOI:10.12122/j.issn.1673-4254.2020.11.06