活化的Mir-30a-wnt/β-catenin信号轴通过上调组织蛋白酶K的表达促进牙周膜干细胞向成牙骨质细胞分化

目的 探讨牙周膜干细胞(PDLSC)成牙骨质向分化过程中mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控组织蛋白酶K(CTSK)表达的功能作用.方法 极限稀释法分离培养PDLSC,釉基质蛋白衍生物(EMD)诱导细胞成牙骨质向分化.在细胞分化过程中,通过microRNA芯片筛选差异表达的microRNA.首先,给予不同分组细胞EMD诱导和/或抑制microRNA表达等处理,无干预组细胞作为对照.利用qPCR和Western blot技术首先验证差异表达的microRNA是否能够调控CTSK的表达.之后,将细胞膜片复合陶瓷支架材料植入裸鼠皮下,利用免疫组织化学方法观察成牙骨质细胞标记蛋白CAP...

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Published in:南方医科大学学报 2021, Vol.41 (10), p.1439-1447
Main Authors: 刘芬, 周志斐, 薛洋, 朱斌, 吴补领, 陈发明
Format: Article
Language:Chinese
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Summary:目的 探讨牙周膜干细胞(PDLSC)成牙骨质向分化过程中mir-30a-wnt/β-catenin信号轴调控组织蛋白酶K(CTSK)表达的功能作用.方法 极限稀释法分离培养PDLSC,釉基质蛋白衍生物(EMD)诱导细胞成牙骨质向分化.在细胞分化过程中,通过microRNA芯片筛选差异表达的microRNA.首先,给予不同分组细胞EMD诱导和/或抑制microRNA表达等处理,无干预组细胞作为对照.利用qPCR和Western blot技术首先验证差异表达的microRNA是否能够调控CTSK的表达.之后,将细胞膜片复合陶瓷支架材料植入裸鼠皮下,利用免疫组织化学方法观察成牙骨质细胞标记蛋白CAP和CEMP-1的表达变化,明确受microRNA调控的CTSK表达变化是否参与了PDLSC成牙骨质分化.在此基础上,从蛋白学水平观察wnt信号通路在microRNA调节CTSK表达过程中是否发挥了相应功效.结果 EMD诱导PDLSC成牙骨质向分化过程中,多种microRNA表达发生变化,其中miR-30a表达出现特异性上调(P
ISSN:1673-4254
DOI:10.12122/j.issn.1673-4254.2021.10.01