双氢杨梅素通过诱导自噬减轻慢性帕金森病小鼠的细胞焦亡和坏死性凋亡

• Published in: 南方医科大学学报 2023, Vol.43 (8), p.1268-1278
• Main Authors: 张蒙, 张源源, 牛梦竹, 朱悦, 童诗逸, 寇现娟
• Format: Article
• Language: Chinese
• ISSN: 1673-4254
• DOI: 10.12122/j.issn.1673-4254.2023.08.02

目的 探讨8周的双氢杨梅素(DHM)对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)/丙磺舒(probenecid)(MPTP/p)诱导慢性帕金森病(PD)小鼠运动功能障碍的影响及其分子机制.方法 C57BL/6小鼠腹腔注射MPTP/p构建PD模型,将60只健康雄性小鼠随机分为4组(n=15):对照组(Control)、模型组(PD)、DHM干预组(PD+DHM)、阳性对照NEC-1抑制剂组(PD+NEC-1).除对照组外,其余小鼠(n=45)腹腔注射MPTP(25 mg·kg-1·d-1)联合Probenecid(250 mg·kg-1·d-1),每周2次,干预5周构建慢性PD模型.造模结束后,DHM干预组进行8周DHM灌胃处理(100 mg·kg-1·d-1,5 d/周),阳性对照组进行5周NEC-1腹腔注射(6.25 mg·kg-1·d-1,2 d/周).随机选取小鼠进行运动协调性测试(n=10);免疫荧光染色观察黑质内TH、GFAP、Iba-1的表达(n=3);ELISA检测小鼠血清中IL-1β;试剂盒测定纹状体内LDH酶活性;RT-PCR测定TNF-α及IL-6的mRNA水平;Western blot检测小鼠纹状体中TH和病理蛋白α-syn、神经炎症、细胞焦亡、坏死性凋亡及自噬相关蛋白的表达.1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)激活Bv-2小胶质细胞,采用不同浓度的DHM(3.12、6.25、12.5μg/mL)及自噬抑制剂3-MA进行干预;Western blot检测干预后Bv-2细胞自噬及NLRP3炎症小体相关蛋白的表达水平;PI染色检测细胞的死亡情况.结果 与对照组相比,PD组小鼠存在运动功能障碍,且TH的阳性细胞数及蛋白水平显著下降(P