电化学发光反转录聚合酶链式反应技术检测齿兰环斑病毒

发展高效的病毒检测技术已成为当今生物学研究的热点之一。本研究将反转录聚合酶链式反应（PCR）技术与电化学发光分析方法结合起来，用于检测兰花中齿兰环斑病毒。检测过程中采用生物素标记的探针与PCR产物杂交，可起到筛选特异性产物的作用，从而避免假阳性结果的产生。三联吡啶钉标记探针与PCR产物杂交，既可以起到进一步筛选目的片段的作用，又可与分析液中的三丙胺反应，从而产生光信号，被电化学发光仪所检测到。在引物的5′端分别连接一段特异性核酸序列，既提高了钉探针与特异性产物的杂交几率，又增强了样品检测信号，从而提高了信躁比。实验结果表明：此方法灵敏度高、稳定性好、操作简单，可以从兰花样品中准确地检测到齿兰环...

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Published in:Fēnxī huàxué 2006, Vol.34 (8), p.1087-1090
Main Author: 唐亚兵 邢达 刘晋峰 朱德斌
Format: Article
Language:Chinese
Subjects:
三联吡啶钌
电化学发光
齿兰环斑病毒
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Description
Summary:发展高效的病毒检测技术已成为当今生物学研究的热点之一。本研究将反转录聚合酶链式反应（PCR）技术与电化学发光分析方法结合起来，用于检测兰花中齿兰环斑病毒。检测过程中采用生物素标记的探针与PCR产物杂交，可起到筛选特异性产物的作用，从而避免假阳性结果的产生。三联吡啶钉标记探针与PCR产物杂交，既可以起到进一步筛选目的片段的作用，又可与分析液中的三丙胺反应，从而产生光信号，被电化学发光仪所检测到。在引物的5′端分别连接一段特异性核酸序列，既提高了钉探针与特异性产物的杂交几率，又增强了样品检测信号，从而提高了信躁比。实验结果表明：此方法灵敏度高、稳定性好、操作简单，可以从兰花样品中准确地检测到齿兰环斑病毒，有望发展成为一种高效的病毒检测方法。
ISSN:0253-3820
DOI:10.3321/j.issn:0253-3820.2006.08.008