恒电位自动滴定法分析脂肪酶水解活性影响因素

Q814; 利用恒电位自动滴定法分析了脂肪酶(Candida rugosa lipase,CRL)催化橄榄油水解活性的影响因素,确定了适宜的酶活性测定条件,对比了传统表面活性剂和咪唑类离子液体对酶活性的影响.37 ℃时,与酶蛋白浓度呈线性关系的酶活性测定范围为1～14 μmol/min;酶蛋白浓度范围为0.01～0.07 g/L;水解反应的米氏常数Km＝4.828×10-4 mol/L,最大反应速率3.498×10-3 mol/min;缓冲液pH值 7.2、温度 37 ℃,搅拌速度为1200 r/min;PVA、AOT和卵磷脂对酶活的促进和抑制作用与其浓度有关,最大相对酶活力分别为297%,2...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:分析化学 2011, Vol.39 (3), p.351-355
Main Authors: 赵炜, 黄卓楠, 李娜
Format: Article
Language:Chinese
Online Access:Get full text
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Description
Summary:Q814; 利用恒电位自动滴定法分析了脂肪酶(Candida rugosa lipase,CRL)催化橄榄油水解活性的影响因素,确定了适宜的酶活性测定条件,对比了传统表面活性剂和咪唑类离子液体对酶活性的影响.37 ℃时,与酶蛋白浓度呈线性关系的酶活性测定范围为1～14 μmol/min;酶蛋白浓度范围为0.01～0.07 g/L;水解反应的米氏常数Km＝4.828×10-4 mol/L,最大反应速率3.498×10-3 mol/min;缓冲液pH值 7.2、温度 37 ℃,搅拌速度为1200 r/min;PVA、AOT和卵磷脂对酶活的促进和抑制作用与其浓度有关,最大相对酶活力分别为297%,255%和154%;离子液体对酶活的最大促进效果为[OMIM][Br] ＞[BMIM][Br] ＞[EMIM][Br]＞[OMIM][BF4]＞[BMIM][BF4]＞[EMIM][BF4];最大相对酶活力分别可达到1734%,1709%,1579%,1063%,1030%和960%;阴离子种类对酶活性的影响大于阳离子种类的影响;离子液体的烷基链长对酶活性的影响与其浓度密切相关,烷基链越长,其达到最大酶活促进效果的浓度越低.本研究为筛选合适的离子液体种类及浓度提供了快速有效的分析方法.
ISSN:0253-3820
DOI:10.3724/SP.J.1096.2011.00351