双水相萃取结合液相色谱法分离蛋白质

建立了PEG/（NH4）2SO4双水相体系萃取富集,结合液相色谱分离分析多种蛋白质的方法。考察了无机盐种类和浓度、PEG分子量、pH值和温度等因素对双水相形成以及对细胞色素C、肌红蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶、胰蛋白酶分配行为的影响。结果表明,上述5种蛋白在室温、pH 3.5～9.0范围内,可在15%PEG-4000/10%（NH4）2SO4双水相体系中得到富集,且主要集中在下相。同样条件下,血清中的高丰度蛋白在上下相均有分配,下相分配量较大。通过双水相萃取分离蛋白质及对液相色谱一定时间段的色谱峰收集,可初步实现血清中高丰度蛋白质的分离去除。...

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Published in:分析化学 2012, Vol.40 (1), p.38-42
Main Author: 赵新颖 屈锋 董敏 陈凡 罗爱芹 张经华
Format: Article
Language:Chinese
Subjects:
双水相萃取
蛋白质分离
血清
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Description
Summary:建立了PEG/（NH4）2SO4双水相体系萃取富集,结合液相色谱分离分析多种蛋白质的方法。考察了无机盐种类和浓度、PEG分子量、pH值和温度等因素对双水相形成以及对细胞色素C、肌红蛋白、牛血清白蛋白、溶菌酶、胰蛋白酶分配行为的影响。结果表明,上述5种蛋白在室温、pH 3.5～9.0范围内,可在15%PEG-4000/10%（NH4）2SO4双水相体系中得到富集,且主要集中在下相。同样条件下,血清中的高丰度蛋白在上下相均有分配,下相分配量较大。通过双水相萃取分离蛋白质及对液相色谱一定时间段的色谱峰收集,可初步实现血清中高丰度蛋白质的分离去除。
ISSN:0253-3820
DOI:10.3724/SP.J.1096.2012.10671