雷公藤内酯醇靶蛋白的筛选及其结合的初步验证

采用噬菌体展示肽库技术筛选雷公藤内酯醇的靶蛋白,得到了一个肽段,并通过酶联免疫吸附（ELISA）和免疫共沉淀验证了该片段对雷公藤内酯醇的结合特异性。用Basic Local Alignment Search Tool（BLAST）进行序列对比后,找到了77个匹配序列,其中最为匹配的序列是人类类固醇生成因子-1（hSF-1）,因此hSF-1可能是雷公藤内酯醇的一个潜在受体。在大肠杆菌中表达纯化了hSF-1的配体结合域（LBD）,荧光光谱实验表明雷公藤内酯醇对hSF-1-LBD有荧光淬灭作用、等温滴定量热（ITC）实验表明雷公藤内酯醇与hSF-1-LBD发生焓驱动的特异性结合,表面等离子体共振（S...

Full description

Saved in:
Bibliographic Details
Published in:分析化学 2012, Vol.40 (3), p.365-370
Main Author: 杨旭光 徐晓煜 李家璜 姚其正 朱彤阳 华子春 郑伟娟
Format: Article
Language:Chinese
Subjects:
噬菌体随机肽库
等温滴定量热
类固醇生成因子-1
荧光光谱
雷公藤内酯醇
Online Access:Get full text
Tags: Add Tag
No Tags, Be the first to tag this record!
Description
Summary:采用噬菌体展示肽库技术筛选雷公藤内酯醇的靶蛋白,得到了一个肽段,并通过酶联免疫吸附（ELISA）和免疫共沉淀验证了该片段对雷公藤内酯醇的结合特异性。用Basic Local Alignment Search Tool（BLAST）进行序列对比后,找到了77个匹配序列,其中最为匹配的序列是人类类固醇生成因子-1（hSF-1）,因此hSF-1可能是雷公藤内酯醇的一个潜在受体。在大肠杆菌中表达纯化了hSF-1的配体结合域（LBD）,荧光光谱实验表明雷公藤内酯醇对hSF-1-LBD有荧光淬灭作用、等温滴定量热（ITC）实验表明雷公藤内酯醇与hSF-1-LBD发生焓驱动的特异性结合,表面等离子体共振（SPR）实验表明雷公藤内酯醇可以与hSF-1-LBD剂量依赖性结合,这些都证实了hSF-1与雷公藤内酯醇存在特异性相互作用。
ISSN:0253-3820
DOI:10.3724/SP.J.1096.2012.10481