构建基于姜黄素-Hg2+复合物的荧光传感器检测脂肪酶活性

以吐温40-姜黄素复合物胶束为荧光信号探针,Hg2+为猝灭剂,巯基乙酸甲酯为脂肪酶的底物,构建了检测脂肪酶活性的生物传感器.利用Hg2+与姜黄素β-二酮结构结合,猝灭吐温40-姜黄素复合物胶束荧光;而脂肪酶的加入催化了巯基乙酸甲酯水解生成巯基乙酸,巯基乙酸夺取姜黄素-Hg2+复合物上的Hg2+,吐温40-姜黄素复合物胶束的荧光恢复,荧光恢复强度与脂肪酶的活性相关.利用此荧光传感策略定量检测脂肪酶活性,在最佳实验条件下,荧光强度变化值与脂肪酶活性在2～80 U/mL范围内呈线性关系,检出限为0.01 U/mL.采用此方法对另外4种商业脂肪酶的活性进行了检测,实验结果与恒电位滴定法测定结果一致.本...

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Published in:分析化学 2018, Vol.46 (10), p.1588-1594
Main Authors: 吴胜男, 张浩, 江凌, 霍峰蔚, 田丹碧
Format: Article
Language:Chinese
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Summary:以吐温40-姜黄素复合物胶束为荧光信号探针,Hg2+为猝灭剂,巯基乙酸甲酯为脂肪酶的底物,构建了检测脂肪酶活性的生物传感器.利用Hg2+与姜黄素β-二酮结构结合,猝灭吐温40-姜黄素复合物胶束荧光;而脂肪酶的加入催化了巯基乙酸甲酯水解生成巯基乙酸,巯基乙酸夺取姜黄素-Hg2+复合物上的Hg2+,吐温40-姜黄素复合物胶束的荧光恢复,荧光恢复强度与脂肪酶的活性相关.利用此荧光传感策略定量检测脂肪酶活性,在最佳实验条件下,荧光强度变化值与脂肪酶活性在2～80 U/mL范围内呈线性关系,检出限为0.01 U/mL.采用此方法对另外4种商业脂肪酶的活性进行了检测,实验结果与恒电位滴定法测定结果一致.本方法检测成本低,操作简单,灵敏度高,具有良好的实用性,可用于脂肪酶活性的高通量检测.
ISSN:0253-3820
DOI:10.11895/j.issn.0253-3820.181187