季铵化磁性壳聚糖复合材料对磷酸化肽的富集研究

蛋白质磷酸化是最重要和最普遍的翻译后修饰之一,蛋白质磷酸化的测定对于全面了解生物过程中的磷酸化途径至关重要.质谱技术是分析蛋白质磷酸化的重要手段,但磷酸化肽固有的低丰度、低电离效率以及与非磷酸化肽共存等特性严重影响质谱对其进行直接分析.为解决此问题,需在质谱分析前对磷酸化肽进行选择性富集.本研究制备了一种基于季铵化磁性壳聚糖的复合材料用于磷酸化肽的富集.此磁性材料具有快速的磁响应性、良好的生物相容性、正电性以及廉价易得等优点.采用β-酪蛋白作为模型蛋白质,结果表明此材料对磷酸化肽具有良好的富集选择性.经过富集后,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测手段,方法的检...

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Published in:分析化学 2023, Vol.51 (6), p.1051-中插10
Main Authors: 周丝, 彭宇, 陈燕萍, 贾琼
Format: Article
Language:Chinese
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Description
Summary:蛋白质磷酸化是最重要和最普遍的翻译后修饰之一,蛋白质磷酸化的测定对于全面了解生物过程中的磷酸化途径至关重要.质谱技术是分析蛋白质磷酸化的重要手段,但磷酸化肽固有的低丰度、低电离效率以及与非磷酸化肽共存等特性严重影响质谱对其进行直接分析.为解决此问题,需在质谱分析前对磷酸化肽进行选择性富集.本研究制备了一种基于季铵化磁性壳聚糖的复合材料用于磷酸化肽的富集.此磁性材料具有快速的磁响应性、良好的生物相容性、正电性以及廉价易得等优点.采用β-酪蛋白作为模型蛋白质,结果表明此材料对磷酸化肽具有良好的富集选择性.经过富集后,结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)检测手段,方法的检出限为0.4 fmol.本方法被成功用于脱脂牛奶中磷酸化肽的检测,表明其对复杂样品中磷酸化肽的富集和检测具有良好的应用潜力.
ISSN:0253-3820
DOI:10.19756/j.issn.0253-3820.231052