TRIP13基因mRNA在慢性淋巴细胞白血病B淋巴细胞的表达及其调控JVM-2细胞增殖和凋亡的分子机制探讨

【摘要】目的探讨甲状腺激素受体相互作用分子13（TRIP13）基因表达和慢性淋巴细胞白血病（CLL）的相关性，验证TRIP13基因在CLL发生发展中发挥的生物学功能，探讨TRIP13基因调控CLL发生发展的下游分子机制。方法①应用实时荧光定量PCR检测30例CLL患者和12名造血干细胞供者（正常对照组）外周血CD19’B淋巴细胞TRIP13mRNA的表达水平。②使用慢病毒介导的shRNA干扰JVM-2细胞TRIP13mRNA和蛋白表达水平，同时使用随机序列shRNA处理JVM-2细胞作为对照组，分别应用MTT法和流式细胞术检测TRIP13干扰组、对照组JVM．2细胞的增殖和凋亡情况。@West...

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Published in:中华血液学杂志 2017, Vol.38 (7), p.618-622
Main Author: 周可树 张青 张文涛 刘燕燕 吴胜胜 周健 魏旭东 宋永平
Format: Article
Language:Chinese
Subjects:
B细胞
JVM-2细胞
TRIP13
基因
慢性
淋巴细胞
白血病
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Summary:【摘要】目的探讨甲状腺激素受体相互作用分子13（TRIP13）基因表达和慢性淋巴细胞白血病（CLL）的相关性，验证TRIP13基因在CLL发生发展中发挥的生物学功能，探讨TRIP13基因调控CLL发生发展的下游分子机制。方法①应用实时荧光定量PCR检测30例CLL患者和12名造血干细胞供者（正常对照组）外周血CD19’B淋巴细胞TRIP13mRNA的表达水平。②使用慢病毒介导的shRNA干扰JVM-2细胞TRIP13mRNA和蛋白表达水平，同时使用随机序列shRNA处理JVM-2细胞作为对照组，分别应用MTT法和流式细胞术检测TRIP13干扰组、对照组JVM．2细胞的增殖和凋亡情况。@Westernblot法检测TRIP13干扰对JVM-2细胞凋亡相关蛋白表达的影响。结果①30例CLL患者外周血B淋巴细胞TRIP13mRNA表达水平（2^△Ct=0．01489）高于正常对照组（2^△Ct=0．00019）（P〈0．001）。②在JVM2细胞中筛选出有效干扰shRNA靶点，下调TRIP13的表达能够有效抑制JVM-2细胞增殖并促进细胞凋亡。③干扰TRIP13后JVM-2细胞Myc和Bcl-2蛋白表达下调（P〈0．001），Bax、caspase3、Bad蛋白表达上调（P〈0．001）。结论CLL患者外周血CD19^＋B淋巴细胞TRIP13mRNA表达上调；TRIP13基因通过影响细胞增殖和凋亡相关蛋白表达而调控JVM2细胞的增殖与凋亡。
ISSN:0253-2727
DOI:10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2017.07.013