MICROPROPAGATION OF Pinus tecunumanii

• Published in: Ciência florestal 2019-02, Vol.28 (2)
• Main Authors: Zanella, Laudiane Bruna, Franciscon, Luziane, Grunennvaldt, Renata Lúcia, Tomasi, Jéssica de Cássia, Degenhardt-Goldbach, Juliana
• Format: Article
• Language: English
• Subjects: alongamento; elongation; enraizamento; multiplicação de brotações; rooting; shoot multiplication
• ISSN: 0103-9954

Pinus tecunumanii is one of the most important tropical species of Pinus in Brazil. This work aimed to develop a micropropagation protocol for Pinus tecunumanii from the apical shoots of young plants grown in a greenhouse. To optimise the aseptic treatment protocol, the effect of 0.05 or 0.1% mercuric chloride in combination with 0 or 1 g L-1 fungicide and NaOCl was evaluated. Next, the effect of 2 or 4 μM BA (6-benzyl adenine) on in vitro multiplication was evaluated over three subcultures. Supplementation with 1.5 g L-1 activated charcoal was tested for elongation. For rooting, the effects of WV5 salts (at half strength) and 20 g L-1 sucrose were evaluated on media supplemented with 2.68 μM naphthalene-acetic acid and 0.44 μM BA. Aseptic treatment of explants with 0.05% mercuric chloride and sodium hypochlorite (with or without fungicide) was effective to establish 83.3% of explants in vitro. On media supplemented with 2 or 4 μM BA, shoot multiplication was promoted. After the third subculture on medium supplemented with 2 μM BA, 70.83% of the explants exhibited new shoots with an average of 3.7 new shoots per explant. On medium containing activated charcoal, elongation was observed in 59.76% of the explants, while on medium without activated charcoal only 33.33% elongated. Rooting was observed in 14.8% of explants on medium supplemented with WV5 salts. Pinus tecunumanii é uma das espécies tropicais mais importantes do gênero Pinus no Brasil. Este trabalho teve por objetivo desenvolver um protocolo de micropropagação para Pinus tecunumanii a partir de gemas apicais de plantas jovens mantidas em casa de vegetação. Para a assepsia foi avaliado o efeito de 0,05 ou 0,1% de cloreto de mercúrio em combinação com 0 ou 1 g L-1 de fungicida e NaOCl. O efeito de 2 ou 4 μM BA (6-benzil adenina) foi avaliado na multiplicação in vitro ao longo de três subcultivos. O efeito da adição de 1,5 g L-1 de carvão ativado foi avaliado no meio de alongamento. Para o enraizamento, o efeito dos sais WV5 meia força e de 20 g L-1 de sacarose foi avaliado em meio suplementado com 2.68 μM ácido naftaleno acético (ANA) e 0.44 BA. A assepsia dos explantes com 0,05% de cloreto de mercúrio, hipoclorito de sódio, com ou sem fungicida foi eficiente no estabelecimento in vitro de até 83,3% dos explantes. Em meio suplementado com 2 ou 4 μM BA ocorreu multiplicação de brotações adventícias e após o terceiro subcultivo, 70,83% dos explantes formaram novos brotos em meio suplementado com 2 μM